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Novus試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因做出分析

發(fā)布時(shí)間： 2022-06-21　　點(diǎn)擊次數(shù)： 850次

　　Novus試劑盒內(nèi)包含了實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑和相關(guān)組份。簡(jiǎn)單快捷的方案設(shè)計(jì)和優(yōu)化的試劑配比，為全球科研工作者提供實(shí)驗(yàn)分析方案。該試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑，操作簡(jiǎn)單便捷；試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，確保更高的檢測(cè)靈敏度。

　　Novus試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理：
　　試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

　　Novus試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因做出分析：
　　1、剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的；
　　2、酶濃度太高，導(dǎo)致最終顯色結(jié)果都是高的；
　　3、包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或許酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強(qiáng)，或許酶標(biāo)儀讀數(shù)規(guī)劃不夠；
　　4、樣本中有可以催化底物的物質(zhì)，沒(méi)洗下來(lái)；
　　5、建議：包被、酶標(biāo)重新做梯度，先用較低的濃度把梯度探究好，然后再優(yōu)化靈敏度，最終調(diào)出所需的靈敏度、線性規(guī)劃；
　　6、有條件的話，可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上，加完底物三分鐘讀數(shù)；
　　7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了；
　　8、酶是自己標(biāo)的這種情況的，HRP比例不要太高。

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